初級檢驗技師考試輔導(dǎo):斑點-ELISA
更新時間：2010-03-24 15:17:58
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初級檢驗技師考試輔導(dǎo):斑點-ELISA
斑點-ELISA(dot-ELISA)的特點是：①以吸附蛋白質(zhì)能力很強的硝酸纖維素膜為固相載體;②底物經(jīng)酶反應(yīng)后形成有色沉淀，使固相膜染色。在實驗室中斑點-ELISA可按下法進行。在硝酸纖維膜上用鉛筆劃成4mm×4mm的小格，在每格中央點加抗原1～2μl，成為一個小點。干燥后將每格剪下分別放入ELISA板孔中，按ELISA方法操作，最后加入能形成不溶性有色沉淀的底物，如在膜上出現(xiàn)染色斑點，即為陽性反應(yīng)。因硝酸纖維素膜吸附性能強，一般在包被后須再進行封閉。如將硝酸纖維素膜裁剪成膜條，并在同一張膜條上點有多種抗原，將整個膜條與同一份血清反應(yīng)，則可同時獲得對多種疾病的診斷結(jié)果。斑點-ELISA的缺點是操作麻煩，特別是洗滌的操作很不方便。
應(yīng)用斑點-ELISA的原理，通過特殊工藝已制備出各種試劑，供臨床檢驗用。一般分三種類型：①將試劑膜粘貼在塑料條片，便于洗滌和觀察。②將試劑膜封在小盒內(nèi)，膜下墊吸水劑，洗滌液通過膜吸入盒內(nèi)。此即斑點免疫滲濾試驗。③將試劑膜固定在小杠框格中放入特殊的自動分析儀中檢測。應(yīng)用這一系統(tǒng)可做各種蛋白質(zhì)、激素、藥物和抗生素的定量測定。
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